ANÁLISE MORFO - FUNCIONAL DE OÓCITOS BOVINOS CLARIFICADOS PARA MODELO DE TREINAMENTO DE ICSI

Abstract

Por apresentarem citoplasmas translúcidos, os oócitos de roedores são mais utilizados nos treinamentos da reprodução assistida, mas esbarrando na bioética animal. No entanto, a viabilização do uso de oócitos bovinos de batedouro torna- se de grande importância, mesmo não sendo de eleição,devido a sua aparência escura. Assim, objetivou- se validar morfo-funcionalmente um modelo bovino de treinamento para ICSI utilizando o método de clarificação citoplasmática de Agostinho et al.,(2008). Os oócitos bovinos de abatedouro foram coletados e maturados in vitro. Após,foram divididos em 2 grupos: grupo controle (GC -não centrifugado);grupo tratamento com oócitos maturos e centrifugados por 15min (9000rpm). Posteriormente foram fertilizados e cultivados in vitro por 10 dias para avaliação das taxas de clivagem,blastocisto e eclosão. A análise morfológica quanto ao deslocamento citoplasmático lipídico foi realizada após a centrifugação. O modelo proposto,indicou haver variações no deslocamento lipídico. A área ocupada pelo estrato lipídico ficou entre 25 e 15% do ooplasma (LIP25= 47,9% e LIP15 = 41,7%; Figura 1 C e 1 D) indicando que 89,6% dos oócitos centrifugados obtiveram uma área clarificada para micromanipulação de pelo menos 75% do ooplasma. A técnica de centrifugação testada foi eficiente para clarificação do ooplasma deixando- os com aspecto similar aos oócitos de roedores e humanos sem perderem as suas competências embrionárias, mantendo- se nos princípios da bioética 3R’s, podendo ser usados como modelo de eleição para treinamentos de profissionais da ICSI humana, sendo portanto uma alternativa ao modelo tradicional usado com cobaias in vivo.