PREVISÃO DA ATIVIDADE INSETICIDA DE LINHAGENS DE Bacillus thuringiensis ATRAVÉS DA ANÁLISE DO PERFIL DE PROTEÍNAS Cry

Abstract

O presente trabalho tem como objetivo a análise do perfil eletroforético das proteínas Cry, encontradas em diferentes linhagens da bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis (Bt), estocadas no banco de linhagens da Universidade Estadual de Londrina. Portanto, a análise utilizou a metodologia deeletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (SDS-PAGE), sendo que para os experimentos, foi necessária a implantação da técnica no laboratório da Universidade. A análise foi baseada nos cristaisprotéicos, produzidos pela bactéria durante a fase de esporulação, portanto para a obtenção dos mesmos, as linhagens foram cultivadas em meio de cultivo até completa esporulação ocorrendo então a liberação dos cristais protéicos. Foram analisadas 40 linhagens de B. thuringiensis. Os cristais são compostos por proteínas Cry, que proporcionam a atividade entomopatogênica, característica desta bactéria. São descritas uma grande variedade de proteínas Cry, cujo tamanho pode variar de cerca de 30 kDa a 130 kDa, sendo que proteínas Cry de peso molecular semelhantes podem apresentar toxicidade a insetos pertencentes à mesma ordem. Através da metodologia utilizada foi possível identificar proteínas com peso molecular de130 kDa, 70 kDa , 65 kDa, 60 kDa, 50 kDa, 30 kDa e 25 kDa, entre outros. Diversos projetos do nosso grupo envolvem pesquisas sobre a presença dos genes codificadores para as proteínas Cry através de PCR utilizando iniciadores específicos para os diferentes genes cry. Através desses projetos, pode-se correlacionar os resultados, visando a identificação de novos genes cry ainda não descritos, além de direcionar bioensaios para cada ordem de inseto alvo, conforme o tamanho das proteínas Cry ou o tipo de genes cry identificados.