ANÁLISE DE POLIMORFISMO GENÉTICO DOS FUNGOS Aspergillus niger E Aspergillus carbonarius ENCONTRADOS EM UVAS VENDIDAS NO COMÉRCIO NA CIDADE DE MARINGÁ-PR

Abstract

A contaminação de alimentos por fungos pode ocasionar riscos à saúde, principalmente quando são produzidas micotoxinas. Dentre essas toxinas, a ocratoxina A (OTA) tem recebido atenção por produzir diversos efeitos tóxicos carcinogênicos, teratogênicos, imunossupressores e nefrotóxicos. A OTA é principalmente produzida por fungos do gênero Aspergillus spp., que pode contaminar uvas em seus diversos estágios de produção, sendo que as espécies mais comumente encontradas nestas frutas são o Aspergillus niger e A. carbonarius. A contaminação pode variar dependendo das características climáticas da região de cultivo da uva, portanto este trabalho tem como objetivo a pesquisa de Aspergillus niger e A. carbonarius em amostras de uvas coletadas no comércio da cidade de Maringá a fim de se estimar a presença do fungo nas produções da região. Os fungos encontrados também serão analisados geneticamente com o objetivo de se realizar comparação quanto à variabilidade genética existente entre ambas as espécies. Para a realização desta análise, serão feitas culturas em meio Sabouraud a partir das amostras de fruta para obtenção do fungo, que será identificado e seu micélio submetido à extração de DNA com o tampão de extração contendo EDTA, NaCl, Tris-HCL, SDS e clorofórmio-fenol. O material obtido será analisado por método de amplificação de fragmentos via RAPD-PCR que tem se mostrado útil em estudos de variabilidade molecular já que utiliza primers inespecíficos e, portanto não exige conhecimento prévio do genoma, além de possuir baixo custo e ser de fácil execução. Os fragmentos obtidos serão visualizados em gel de agarose através de aparelho transiluminador para se avaliar o polimorfismo genético existente, e os dados obtidos na pesquisa serão tabulados e submetidos à análise estatística.